若没有PCR,根据DNA复制原理,怎么样发明一个PCR?
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发布时间:2009-12-11 13:20:21
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分子生物学内容
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发明PCR的人是鬼才。。。就别想着自己发明个PCR了。
目前PCR原理是:根据DNA复制原理,加入一对引物,在需要扩增的片段的上游至少300bp位置上设计
加入DNA合成的原料,即四种碱基dNTPs,N代表A,G,T,C中任何一种,加入缓冲体系,提供合适的反应环境,最后加入DNA合成酶,实验室常用Taq polymerase和DNA作为模板。首先高温使DNA双链解离,在退火到合适温度,这个一般根据引物设计的温度来,让引物与DNA单链结合,再升温到72°左右,DNA合成酶就会迅速结合进行DNA链的合成延伸,这三个步骤循环,就会产生大量的目的片段的扩增产物。
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