薄层色谱测头孢氨苄胶囊的步骤？？
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  发布时间：2011-08-23 16:15:17

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1 材料和方法
1．1 材料CS-9000双波长飞点快速扫描仪，点样定量毛细管(美国Drummond公司)，硅胶G(青岛海洋化工厂)，芍药苷(含量测定用，批号：0736—2001I7)、大黄素对照品购自中国药品生物制品鉴定所；中性氧化铝(天津市化学试剂厂)，自铺板(1Ocm×lOcm×0.4mm)以2.5g／L羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板，所用试剂均为分析纯。样品来源：本院中草药制剂室生产，60粒／瓶， 批号20030701，20030724， 20030820。
1．2 方法
1．2．1 取本品胶囊2粒，内容物加(6—100)盐酸甲醇lOml，冷浸2h，滤过，滤液蒸干，残渣用甲醇溶解制成lml，作为供试品溶液。另取大黄素对照，加乙醇制成每1ml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试 107 ，吸取上述溶液备3μl，分别点十以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-甲酸乙酯-甲酸(15：5：1)为展开，取出，晾干，置日光下检视。供试品色谱中，在与对照品和对照药材 色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
1．2．2 取本品胶囊10粒，加甲醇50ml，加热回流l小时，滤过，滤液蒸干，残渣加蒸馏水3Oml使溶解，用水饱和的正丁醇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，用水洗涤2次，每次30ml，弃去水液，正丁醇液置水浴上蒸干，残渣加甲醇lOml溶解，加于已处理好的中性氧化铝柱(7O目，8g，内径15mm)上，以95％甲醇洗脱，收集洗脱液置水浴土蒸干用甲醇定容军lml，作为供试品溶液。另取芍药甙对照品，加甲醇制成每1ml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述溶液各2μl，分别点于以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水(65：35：10)的下层溶液为展开剂，分别展开，取出，晾干，喷以20％硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2 结果
2．1 薄层样品溶液的制备取1．2．2项下作为供试品溶液。精密称取芍药苷标准品1.30mg，用甲醇溶解并定容至lml。备用。
2．2 薄层色谱条件的选择层析板：自制2.5g／L羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板(1Ocm×lOcm×0.4mm)，100℃活化30min后置干燥器内备用。展开剂：以氯仿-甲醇-水 (65：35：10)放置分层的下层溶液。显色剂：香草醛硫酸试液。
2．3 样品的含量测定测定条件：对层析后的样品及标准品在400～700nm范围内扫描，二者在580nm处均有最大吸收。因此测定波长λs=580nm，Λr=7OOnm，线性化参数SX=3，双波长反射锯齿法扫描。精密吸取芍药苷标准晶溶液1，2，3，4，5，6，7μ1．点于同一薄层板上，按选定的色谱条件展开后。 置薄层扫描仪上测定峰面积积分值，对所得的数据进行分析处理得回归方程为Y=4018.18X+4465.69，相关系数r=O.9994。结果表明：芍药苷点样量1.3～9.1μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系。精密吸取一定量对照晶溶液及供试品溶液，点于同一薄层板上。按上述条件展开，扫描。(Tab1)将层析后的大黄素样品测定峰面积积分值，每隔15min测定一次，连续测4次。结果lh内稳定，RSD为1.99％。精密吸取供试品溶液3μl，在同一薄层板上点5个相同量的点，依法测定各斑点峰面积积分值，结果RSD为1.93％。精密吸取同批样品一定量，分别点于5块层析板上，依法测定峰面积积分值，结果RSD为2.00％。精密称取已知含量的同批样品适量，准确加入一定量的芍药苷，按供试品溶液的制备方法制备，依法测定大黄素的含量，计算回收率为98.15％，RSD为1.57％(n=3)。